Estudo de marcação do kit de ubiquicidina 29-41 com tecnécio-99m: peptídeo utilizado na identificação de focos de infecção

XXVI Congreso Brasileño de Medicina Nuclear 11 de octubre al 14 de octubre de 2012 Salvador de Bahía, Brasil
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Introdução: Uma importante área de investigação é o desenvolvimento de radiofármacos para realizar diagnóstico preciso de focos de infecção em Medicina Nuclear diagnóstica. Sendo assim, diversos radiofármacos baseados em peptídeos radiomarcados, dentre eles o peptídeo ubiquicidina e seus fragmentos, vêm sendo propostos para avaliação de focos de infecção in vivo.

Objetivo: Avaliar o rendimento de marcação de um kit liofilizado baseado no fragmento do peptídeo ubiquicidina 29-41, utilizando diferentes atividades e volumes de tecnécio-99.

Materiais e Métodos: O kit para marcação é constituído de dois frascos: um frasco contendo 25 μg do fragmento de ubiquicidina 29-41 e 14,5 μg de SnCl2.2H2O e um segundo frasco contendo a solução tampão de carbonato/bicarbonato pH 9,0. A solução de pertecnetato de sódio-99mTc é adicionada no segundo frasco e em seguida a mistura é transferida para o kit aguardando 15 minutos a temperatura ambiente e pH 9,0. Após a reação, uma amostra de 20 μL é retirada e colocada em cartucho Sep Pak C18 acondicionado com 5 mL de etanol e 5 mL de água, para avaliar o rendimento de marcação. A amostra no cartucho é eluída com 5 mL de água e 10 mL da mistura metanol/HCl 1M 80:20. Após a eluição as soluções e o cartucho são medidos num calibrador de dose e a fração do peptídeo marcado sai na solução orgânica. A seguir o peptídeo é diluído com solução salina 0,9% até o pH 7 e o controle de pureza radioquímica é realizado empregando a técnica de cromatografia ascendente, utilizando fita de papel Whatman 3 como suporte e acetona na fase móvel e fita de Sílica Gel 60 e tampão acetato de amônio 1M/metanol 1:1. A pureza radioquímica é expressa em porcentagem do peptídeo radiomarcado.

Resultados: Os resultados obtidos de rendimento de marcação variando o volume de Na99mTcO4, do tampão pH 9,0, da solução salina 0,9% para diluição e o pH final da solução, com atividade radioativa de 185 e 1111 MBq, apresentaram rendimento de marcação em torno de 97,0% para todas as condições analisadas, sendo o pH final da solução entre 7,0 e 8,0. Baseado nestes resultados, foram realizadas marcações com atividade de 740 MBq empregando 0,2 mL de tampão carbonato/bicarbonato pH 9,0, 2,0 mL de solução de Na99mTcO4 e 3,0 mL de solução salina 0,9% para diluição. O ensaio de pureza radioquímica por cromatografia em papel utilizando acetona como fase móvel apresentou 98,0 ± 0,5% para as espécies de Rf=0 (peptídeo radiomarcado e espécies coloidais de 99mTc). Já no sistema Sílica Gel 60 e tampão acetato de amônio 1M/metanol 1:1 observou-se 16,5 ± 2,5% da espécie com Rf=0, provavelmente relacionada a espécies coloidais de 99mTc. O produto radiomarcado permeneceu estável durante as 6 horas de avaliação.

Conclusão: A metodologia de marcação proposta para o kit liofilizado de ubiquicidina com tecnécio-99m mostrou bom rendimento de marcação e pureza radioquímica e estabilidade compatíveis com a aplicação in vivo do peptídeo radiomarcado.