Resultados
Estudios in vitro
El precursor fac-[99mTc][(CO)3(H2O)3]+ se obtuvo con una pureza radioquímica superior al 98%, lo que permitió el proceso de sustitución. La técnica de marcación fue realizada por sustitución del precursor con los ligandos fluconazol y voriconazol. Los cromatogramas de ambos complejos [99mTc][(CO)3-L] mostraron la presencia de 2 picos mayoritarios: en el caso del [99mTc][(CO)3-F] a 18,1 y 19,5 min y en relación 1:2; en el caso de [99mTc][(CO)3-V] a los 23 y 23,5 min en una relación 1:1,6. Para el [99mTc][(CO)3-F] se purificó el pico de mayor tiempo de retención, ya que es el que aparece en mayor proporción. Los estudios de estabilidad en el tiempo muestran restablecimiento de las otras especies químicas en el medio (fig. 2); el perfil se mantiene por 4 h, lo que supone un estado de equilibrio para las especies formadas.
Toda la caracterización fisicoquímica y biológica de los complejos se realizó tomando el total de la actividad, sin purificar los picos (tabla 2). Los valores de unión a proteínas reportados en la literatura para fluconazol y voriconazol son de 11 y 58% respectivamente; luego del marcado, los complejos [99mTc][(CO)3-F] y [99mTc][(CO)3-V] presentaron valores de 73,5 y 65,5 % respectivamente. La lipofilia de un compuesto es un parámetro importante, relacionado con su capacidad para atravesar las membranas y con la unión a proteínas plasmáticas. El coeficiente de reparto entre 1-octanol y buffer fosfato de sodio para ambos compuestos mostró una mayor afinidad por la fase acuosa. En el análisis de la estabilidad en plasma, la descomposición para Fluconazol fue de 50% y para Voriconazol de 36% después de 210 min, en ambos casos con nueva formación del precursor tricarbonilo. La unión a levaduras mostró valores del orden del 14% en ambos complejos.
| Complejo | ||||
|---|---|---|---|---|
| Estabilidad en plasmaa | Log P | Unión a proteinasb | Unión a C.Albicansc | |
| [99mTc(CO)3- Fluconazol] | 50 | -0,31 | 74,6 | 14 |
| [99mTc(CO)3- Voriconazol] | 64 | -0,02 | 65,5 | 12 |
aPorcentaje de actividad remanente en los picos principales luego de 210 min de incubación en plasma humano. bPorcentaje de actividad unido a proteínas plasmáticas luego de 90 min de incubación. cPorcentaje de actividad unida al pellet de levaduras.
Estudios in vivo
Los estudios de biodistribución se realizaron a 1 y 3 h; los mejores resultados se obtuvieron a las 3 h post inyección. El comportamiento biológico de ambos compuestos se caracterizó por baja actividad en sangre y riñones; la depuración es principalmente hepatobiliar, mientras que la actividad en el resto de los órganos y tejidos es depreciable. Las relaciones blanco/no blanco (T/NT) se muestran en la tabla 3; a pesar de tener baja captación sanguínea, los 2 complejos presentan bajas relaciones blanco/sangre (T/B), por debajo de 1 en cualquiera de los modelos biológicos utilizados.
En la figura 3 se muestran las imágenes centellográficas de los tres modelos de lesiones.Los valores T/NT de las imágenes fueron 1,26 para inflamación estéril, 2,36 para infección por C.albicans y 1,05 para A. niger. El perfil de los valores concuerda con las distribuciones biológicas.
| Sangre (Candida-Aspergillus) | Hígado (Candida-Aspergillus) | Riñones (Candida-Aspergillus) | T/NTInflamación estéril | T/NT Candida | T/NT Aspergillus | T/B Candida | T/B Aspergillus | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| [99mTc(CO)3- Fluconazol] | 6,9 - 4,1 | 19 - 14,7 | 15 - 8,8 | 1,73 | 2,3 | 2,8 | 0,22 | 0,36 |
| [99mTc(CO)3- Voriconazol] | 3,4 - 5,9 | 11,3 - 16,7 | 6,4 - 8,3 | 1,4 | 2,64 | 1,24 | 0,36 | 0,23 |
